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多巴胺荧光探针 绘制脑图谱的“指路明灯”

作者:
张佳星
来源:
科技日报
2018/08/28 11:19
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一阵浓郁的蕉香袭击着黑暗中的一只果蝇,它“嗡嗡”地兴奋起来,振翅要凑过去。科技日报记者近日走访北京大学生命科学学院发现,研究人员正在试图捕捉这只被钉在显微镜下的果蝇的“思想活动”。“我们可以直接观测到,果蝇感应到气味之后,脑中的多巴胺浓度变化。”正在做实验的博士生曾健智说,“一会儿还会给它一些电信号刺激,观察脑中多巴胺在不同刺激下的响应。”

“闻香起舞”这个简单的画面在“脑图谱”的维度是复杂的—

CellLight®试剂将信号肽或细胞结构蛋白与首次登场的emGFP和TagRFP融合,可准确且特异地定位到亚细胞区室和结构。目前有多种目标可供选择,包括细胞骨架、线粒体和分泌区室,以便实现多重、共定位研究和动态细胞过程的成像。

说到亚细胞结构的标记,除了我们常用的荧光探针,Life Technologies推出了即用型的荧光蛋白载体CellLight®,将信号肽,能将表达的荧光蛋白定位到核、质膜、内质网、高尔基体和过氧化物酶体等亚细胞器中。你只需要将试剂加到细胞中就行了,既不需要转染,也不需要对细胞做任何处理,用起来相当方便。

新推出的CellLight®试剂通过改造的可用于哺乳动物细胞的杆状病毒(BacMam virus)将荧光蛋白导入胞内,不仅安全,而且适合多种细胞类型,包括原代细胞和神经细胞。过去与此技术不兼容的细胞类型(神经元),或转导效果不佳(一些干细胞、CHO)的细胞类型,现在能通过简单的一步过程定量转导。

Life Technologies之前推出的是BacMam 1.0形式的Organelle Lights™和Cellular Lights™,而最新推出的CellLight®试剂则完成了从BacMam 1.0到BacMam 2.0的转换。BacMam 2.0大大提高了这种基于昆虫杆状病毒的基因导入平台的效率和实用性。

CellLight®试剂将信号肽或细胞结构蛋白与首次登场的emGFP和TagRFP融合,可准确且特异地定位到亚细胞区室和结构。目前有多种目标可供选择,包括细胞骨架、线粒体和分泌区室,以便实现多重、共定位研究和动态细胞过程的成像,这种成像需要很高的时空分辨率。CellLight®试剂耐受甲醛的固定,因此与固定细胞分析兼容。

CellLight®试剂的主要优点:

•高效:对多种哺乳动物细胞系的高效转导(>90%),包括原代细胞、干细胞和神经元

•快速方便:只需在您的盖玻片或微孔板中加入CellLight®试剂及细胞,过夜孵育并成像 – 或冷冻保存,分析即用的细胞可留待后用

•低毒性:在哺乳动物细胞中不复制,观察不到致病影响,在1级生物安全水平下操作

•灵活:将不止一种BacMam试剂共转导,开展多重实验或共定位研究,只需改变剂量,即可严谨控制表达水平

与BacMam 1.0颗粒相比,BacMam 2.0融合了新元件,大大增强了转导效率和表达水平,BacMam 2.0试剂有着同样出色的安全性,不会造成细胞病变。目前已有超过90种细胞被BacMam技术高效转导。